بررسی تکثیر و تمایز سلولهای بنیادی خونساز قرار داده شده در داخل میکروکپسول های آلجینیتی اصلاح شده
[پایاننامه]
/حامد علیزاده سردرود
: مهندسی شیمی
، ۱۳۹۳
۸۵ ص
چاپی - الکترونیکی
کتابنامه در آخر پایان نامه
کارشناسی ارشد
بیوتکنولوژی
۱۳۹۳/۱۰/۰۰
صنعتی سهند
سلولهای بنیادی خونساز (HSC) برای تکثیر به فاکتورهای رشد خاصی نیاز دارند .سلولهای بنیادی مزانشیمی (MSC) میتوانند با ترشح فاکتورهای رشد، به تکثیر سلولهای بنیادی خونساز جهت دهند .بنابراین امروزه تحقیقات زیادی درخصوص همزیستی این سلولها و اثر آن بر تکثیر سلولهای بنیادی خونساز انجام شده است .در این پایاننامه قابلیت استفاده از میکروکپسولهای آلجینیت-ژلاتینی به عنوان مدل شبیهسازی شده از مغز استخوان برای همزیستی سلولهای بنیادی خونساز و مزانشیمی بررسی شد .شرایط عملیاتی بهینه تهیه میکروکپسولهای آلجینیتی با استفاده از طراحی آزمایش بدست آمد . سپس سلولهای U۹۳۷ و فیبروبلاست به عنوان مدلی از سلولهای غیر چسبان و چسبان در داخل میکروکپسولهای آلجینیت ژلاتینی کشت داده شدند و میزان تکثیر این سلولها با استفاده از روش شمارش سلولی بدست آمد .درنهایت سلولهای بنیادی خونساز به صورت تکی و همزیستی با سلولهای مزانشیمی در محیط آزاد و داخل میکروکپسولها بدون افزودن فاکتورهای رشد کشت یافتند .میزان افزایش سلولی با استفاده از روش شمارش سلولی تعیین شد .میزان حفظ حالت اولیه سلولهای خونساز نیز با آنالیز میزان بیان مارکرهای سطحی CD۳۴ + و CD۴۵ + پس از ۷ روز مشخص شد .میکروکپسولهای آلجینیتی با اندازه قطر میانگین ۶۳۳ میکرومتر با استفاده از سیستم تزریق الکترواستاتیکی بدست آمدند .شرایط بهینه عملیاتی ولتاژ kv ۸ ، غلظت آلجینیت ۱ ، فاصله نوک سرنگ تا محلول cm۶ و نرخ تزریق ۱/. cc/min بود .سلولهای U۹۳۷ در داخل میکروکپسولها با غلظت آلجینیت و ژلاتین ۱ و ۱/۲۵ درصد به میزان ۲۱/۸ بهترین تکثیر را نشان دادند .سلولهای فیبروبلاست نیز در داخل میکروکپسولها با غلظت آلجینیت و ژلاتین ۱/۲۵ و ۲/۵ تا ۸ برابر زیاد شدند .سلولهای خونساز در داخل میکروکپسولها و در شرایط همزیستی با سلولهای مزانشیمی به میزان ۱/۹ تکثیر یافتند .درصد سلولهای بنیادی پرتوان در داخل میکروکپسولها بر اساس نتایج فلوسایتومتری(CD۳۴) + و(CD۴۵) برای حالت تکی و همزیستی به ترتیب ۷۵ و ۸۰ بود .نتایج تحقیقات نشان میدهد که میکروکپسولهای آلجینیت-ژلاتینی دارای پتانسیل بالایی برای همزیستی سلولهای بنیادی خونساز و مزانشیمی جهت تکثیر سلولهای خونساز بدون استفاده از فاکتورهای رشد میباشند