بررسی تأثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت بر مسیر سیگنالینگ/catenin - Wntو بیان مارکرهای سطح سلولی CD۱۳ و CD۱۴ در رده سلولی لوسمی میلوئیدی مزمن
نام نخستين پديدآور
/مائده قاری
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: دامپزشکی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۶
نام توليد کننده
، میرزائی
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
دامپزشکی
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۶/۰۶/۰۷
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
امروزه بیماریصهای خونی متعددی از جمله انواع لوسمیصها جامعه بشری را رنج میصدهند .لوسمی میلوئیدی مزمن (CML) یک بیماری کلونال در اثر ناهنجاری ژنتیکی از نوع جابجایی کروموزومی بین ژن) abl کروموزوم ۹) و ژن) bcr کروموزوم ۲۲) است که در سلولصهای خونساز مغز استخوان ایجاد میصشود .درمانصهای متعددی برای غلبه بر این بیماریص از قبیل شیمی درمانی با میزان بالا، رادیوتراپی کل بدن و ... وجود دارد که عواملی از قبیل آسیب به سایر سلولصها در شیمیصدرمانی و عفونتصهای اولیه استفاده از این روشصها را محدود کرده است .بنابراین یافتن روش درمانی و مکانسیم عمل آن باعث افزایش درصد بهبود بیماران خواهد شد .مسیر سیگنالینگ/catenin- Wnt، نقش مهمی در پاتوژنز بسیاری از سرطانصها ایفا میصکند CD۱۳ .و CD۱۴ از آنتی ژنصهای سطحی گویچهصهای سفید هستند که در یک تا دو درصد سلولصهای مغز استخوان و در واقع بر روی همه سلولصهای پیش ساز مغز استخوان بیان میصگردند و بر خلاف حضور محدود آنصها در سلولصهای نرمال بطور شایعی در سلولصهای لوسمیک حاد و مزمن یافت میصشوند .این آنتی ژنصها از عوامل مطرح در تعیین پیشصآگهی بیماران مبتلا به لوسمی حاد و مزمن میلوئیدی میصباشند .در این پژوهش، هدف تعیین اثر فاکتورهای مترشحه از سلولصهای بنیادی مزانشیمال مشتق از مغز استخوان رت بر بیان مارکرهای سطح سلولی CD۱۳ و CD۱۴ و بیان ژنصهای دخیل در مسیر سیگنالینگ/catenin - Wntرده سلولی لوسمی میلوئیدی مزمن صکه به روش همصکشتی در مجاورت یکدیگر قرار گرفتهصاند به عنوان عاملی در درمان لوسمی میلوئید مزمن است .در این مطالعه سلولصهای بنیادی مغز استخوان از رت جدا و کشت داده شد .از لحاظ بیان نشانگر-های سطحیCD۹۰ ،CD۱۰۵ ، CD۴۵ و CD۵۶ به روش فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفتند .سلولصهای K۵۶۲ از بانک سلولی پاستور خریداری و در محیط کشت RPMI کشت داده شد .سپس سلولصهای K۵۶۲ با سلولصهای BMSCs در پلیت Transwell به مدت۷ روز در مجاورت یکدیگر -کشت داده شدند .در آخر بیان مارکرصهای سطحی CD۱۳ و CD۱۴ به روش فلوسایتومتری بررسی شد .همصچنین میزان بیان ژنصهای Wnt۳a و - cateninبا روشTime PCR - Realارزیابی گردید .نتایج فلوسایتومتری نشان دادند که بیان این نشانگرصهای سطحی دچار تغییر شدهصاند .میزان این نشانگرصها در گروه تست نسبت به گروه کنترل کاهش داشته است .نتایج حاصل ازTime PCR - Realنیز نشان میصدهد که میزان بیان ژن Wnt۳a افزایش و میزان بیان - cateninکاهش پیدا می-کند که افزایش در میزان بیان ژن Wnt۳a معنیصدار میصباشد)* .P<۰.۰۵)در همصکشتی سلولصهای K۵۶۲ با BMSCs سایتوکاینصهای مترشحه از سلولصهای بنیادی مزانشیمی روی سلولصهای K۵۶۲ تأثیر گذاشته است .این تأثیر به وسیله کاهش بیان نشانگرصهای سطحی CD۱۳ و CD۱۴ تأیید میصشود .کاهش - cateninو مهار مسیر /catenin - Wntبیانصگر تأثیر سلولصهای بنیادی مزانشیمی روی لاین سلولی CML است که میصتواند نقش مهمی در درمان این لوسمی ایفا کند
متن يادداشت
Nowadays, human beings suffer from different kinds of blood diseases such as all kinds of leukemia. Chronic Myeloid Leukemia (CML) is a Clonal disease caused by genetic abnormalities of the chromosomal translocation between abl gene (chromosome 9) and bcr gene (chromosome 22), which occurs in hematopoietic bone marrow cells. Several therapies are available to overcome this disease, such as high-dose of chemotherapy, total radiotherapy and etc. Factors such as damage to other cells in chemotherapy and early infections have limited these methods. Therefore, looking for a proper treatment method and its mechanism of action will increase the percentage of patients cure. The signaling pathway of Wnt/-catenin plays an important role in pathogenesis of many cancers. CD13 and CD14 are white blood cells surface antigens which are expressed in one to two percents of bone marrow cells and on the surface of all bone marrow progenitor cells. In spite of their limited presence in normal cells, they are commonly found in acute and chronic leukemia cells. These antigens are one of the important factors for prognosis of patients with acute and chronic myeloid leukemia. The aim of this study was to determine the effects of secreted factors from rat bone marrow mesenchymal stem cells on the expression of CD13, CD14 cell markers and genes which are involved in Wnt/-catenin signaling pathway in chronic myeloid leukemia cell line. This cell line adjoin to each other by co-culture, and consider as a factor for treatment of chronic myeloid leukemia. Bone marrow mesenchymal stem cells were separated from rats and cultured. Cell surface markers including CD90, CD105, CD45 and CD56 were evaluated using the flow cytometry method. K562 cells were purchased from Pasteur cell bank and cultured in RPMI culture media. Then, K562 cells co-cultured with BMSCs in Transwell Plate for 7 days. Finally, the expression of surface markers of CD13 and CD14 were assessed with flow cytometry method. Moreover, the expression of Wnt3a and -catenin genes was evaluated using Real-Time PCR method. Flow cytometric results showed that expression of these surface markers have changed. The level of these markers in test group was lower than that in control group. Results of Real-Time PCR also indicated that Wnt3a gene expression was increased(P <0.05), and the expression of -catenin was decreased. In a co-culture of K562 cells with BMSCs, K562 cell line has been affected by cytokines secreted from mesenchymal stem cells. This effect is confirmed by reducing the expression of surface markers of CD13 and CD14. The reduction of -catenin and inhibition of the Wnt/-catenin pathway show the effect of mesenchymal stem cells on CML cell line and indicate that it can play an important role in treatment of this leukemia
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )